Nested PCR protocol for the rapid detection of Escherichia coli in potable water

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DOITrouver le DOI : http://doi.org/10.1139/m96-110
AuteurRechercher : ; Rechercher : ; Rechercher : ; Rechercher : ; Rechercher :
TypeArticle
Titre de la revueCanadian Journal of Microbiology
Volume42
Numéro8
Pages862866; nbre. de pages : 5
Sujetenv; nested PCR; sensitive; detection; PCR à l'aide d'amorces imbriquées; sensibilité; détection; eau potable
RésuméUne méthode rapide et sensible de détection des bactéries présentes en faible quantité dans l'eau potable a été développée. Escherichia coli, une bactérie indicatrice de contamination fécale, a été utilisée comme organisme témoin dans le présent protocole de concentration de l'échantillon de l'eau par filtration, suivi d'une réaction en chaîne catalysée par polyméase (PCR) à l'aide d'amorces imbriquées dont les produits ont été visualisés par coloration au bromure d'éthidium. Deux séries d'amorces ont été conçues à partir du gène β-glucuronidase (uidA) spécifique à E. coli, la première paire d'amorces produisant un fragment de 486 pb utilisé comme matrice pour la deuxième série d'amorces imbriquées délimitant un fragment de 186 pb. Cette technique permet de détector d 1-10 cellules/50mL d'échantillon d'eau entre 6 à 8 h. Cette technique est donc beaucoup plus rapide que les méthodes traditionnelles de cuture bactérienne ou d'hybridation Souther qui requièrent de 2 à 3 jours avant d'obtenir des résultats.
Date de publication
Langueanglais
AffiliationInstitut de recherche en biotechnologie du CNRC; Conseil national de recherches Canada
Publications évaluées par des pairsNon
Numéro du CNRC34557
Numéro NPARC3539699
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Identificateur de l’enregistrementce75604f-3a25-4e60-a76e-8231c13616b6
Enregistrement créé2009-03-01
Enregistrement modifié2016-05-09
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