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Production and characterization of the recombinant Islet Neogenesis Associated Protein (rINGAP)

 
 
Affiliation:
National Research Council Canada (NRC-CNRC); NRC Biotechnology Research Institute
Language:
English
Type:
Article
Published in:
Protein expression and purification
Date:
2010
Pages :
1-8
NRCC #:
52738
NPArC #:
14162259
Keywords:
Acids; Amino Acids; Bio; Biotechnology; Cells; Glucose; Human; In vitro; INGAP; Islet neogenesis; Lentiviral transduction; Recombinant protein; Mass spectrometry; Protein; Surgery; Vitro
Group(s):
Bioprocess Center; Centre Bioprocédés
Abstract:
La protéine associée à la néogenèse des cellules productrices d’insuline (INGAP) joue un rôle dans la néogenèse des îlots pancréatiques. Le peptide INGAP, un pentadécapeptide composé des acides aminés 104 à 118, fait régresser le diabète chez les rongeurs et améliore l’homéostasie du glucose chez les patients diabétiques. Le mécanisme d’action de l’INGAP demeure inconnu, mais de telles études tireraient profit de l’utilisation de la protéine recombinante (rINGAP) pleine longueur. Dans le présent article, nous décrivons la production de la rINGAP à partir des cellules 293-SF par suite d’une transduction lentivirale et sa caractérisation par spectrométrie de masse (MALDI-TOF et Q-TOF) et HPLC. Fait important, nous montrons que la rINGAP manifeste une bioactivité cent fois supérieure à celle du peptide INGAP en unités molaires dans un essai in vitro de régénération d’îlots pancréatiques humains. © 2009 Elsevier inc. Tous droits réservés.
 
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